4种非洲猪瘟核酸检测试剂盒性能比较分析
Comparison and analysis of the detection performance of four ASFV nucleic acid detection kits
投稿时间:2021-02-07  
DOI:
中文关键词:  非洲猪瘟  核酸诊断  荧光定量  敏感性  比较
英文关键词:African swine fever  Nucleic acid detection  qRT-PCR  Sensibility  Comparative
基金项目:
作者单位
蔡行 湖南国测生物科技有限公司, 湖南 长沙 410000 
石建 湖南国测生物科技有限公司, 湖南 长沙 410000 
喻恒军 湖南国测生物科技有限公司, 湖南 长沙 410000 
冯静 湖南中净生物科技有限公司, 湖南 长沙 410000 
陈娟 湖南国测生物科技有限公司, 湖南 长沙 410000 
谢惠 湖南中净生物科技有限公司, 湖南 长沙 410000 
喻正军 湖南中净生物科技有限公司, 湖南 长沙 410000 
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中文摘要:
      目的:为猪场实验室提供科学的非洲猪瘟病毒核酸诊断试剂盒选择方案。方法:选择4种非洲猪瘟核酸检测试剂盒,通过对比梯度稀释后标准物质的线性扩增、对低含量时(20 copies/μL)的敏感性、对以纯水为样本时假阳性检出率。结果:线性扩增试验中,A试剂盒对20 copies/μL浓度的标准品检测率为100%(3/3),其他试剂盒对该浓度下的标准品,均未达到100%;低含量敏感性试验中,A试剂盒阳性检出率为91.67%(44/48),其他厂家试剂盒的检出率分别为85.42%(41/48)、79.17%(38/48)、58.33%(28/48);假阳性试验中,A和B未出现阳性反应,而C、D试剂盒分别出现2、1个非特异性反应。结论:经过性能比较,A试剂盒更符合猪场实验室对于高敏感性和低假阳性的要求。
英文摘要:
      Objective: To provide a scientific method for nucleic acid detection of African swine fever virus (ASFV) in pig farm diagnostic laboratory. Methods: To evaluate the four selected ASFV nucleic acid detection kits, the linear amplification assay of reference substance with serial dilution, the sensitivity assay of clinical samples in low concentration (20 copies/μL) and the detection rate of false positive in pure water samples were conducted by employing the four ASFV nucleic acid detection kits. Results: In the linear amplification test, the detection rate of kit A was 100% (3/3) at 20 copies/μL, while the detection rates of other kits were less than 100%; In the sensitivity test, the positive detection rate of kit A was 91.67% (44/48), and the positive rates of other kits were 85.42% (41/48), 79.17% (38/48) and 58.33% (28/48), respectively; In the detection of pure water samples, kits A and B showed no positive reaction, while kits C and D showed 2 and 1 reaction with nonspecific amplification, respectively. Conclusion: In comparison, the kit A with high sensitivity and low false positive rate is more suitable for application in laboratory of pig farms.
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