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| 美洲型和欧洲型PRRSV一步法二重RT-PCR快速检测方法的建立和应用 |
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| 投稿时间：2015-01-13 |
| DOI： |
| 中文关键词: 美洲型PRRSV 欧洲型PRRSV 一步法二重RT-PCR 检测 |
| 英文关键词: |
| 基金项目:山东省现代农业产业技术体系生猪产业创新团队项目(SDAIT-06-011-14);山东省自然科学基金青年基金项目(ZR2014CQ010) |
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| 中文摘要: |
| 根椐GenBank 中已发表的美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)2 种病毒基因序列,分别设计2 对引物。在建立2 种病毒单项一步法RT-PCR 检测方法的基础上,优化一步法二重RT-PCR 反应条件,建立了2 种病毒的一步法二重RT-PCR 检测方法,用这2 对引物对同一样品中的美洲型PRRSV、欧洲型PRRSV 核酸模板进行一步法二重RT-PCR 扩增,结果可同时扩增美洲型PRRSV 的265 bp 和欧洲型PRRSV 的451 bp 的特异性片段,而对其他4 种猪病原的扩增结果均为阴性。敏感性测定结果表明,该方法能检出10 pg 的美洲型PRRSV 和10 pg 的欧洲型PRRSV 模板。通过对175 份临床病料检测,将建立的一步法二重RT-PCR 技术和单项一步法RT-PCR 方法进行对比验证,结果显示,两者的总符合率为100%。表明建立的一步法二重RT-PCR 检测方法,具有特异、快速、准确的特点,可用于对美洲型和欧洲型PRRSV 的同时检测和鉴别诊断。 |
| 英文摘要: |
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